大肠的快速检测方法
1)分子生物学的快速检测方法:在分子的水平上通过研究生物大分子如---、蛋白质的结构来检测大肠。常见方法如下。
a:pcr检测技术聚合酶链式反应简称pcr (polymerasechainreaction),是体外酶促合成特异dn---段的一种方法,扩增的一个周期由高温变性、低温退火、适温延伸等几步反应组成,定量盘价格,反复循环,使目的dna得以迅速扩增,2~4min即可完成一个循环,2~3h就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。大肠的检测可采用pcr技术。通过pcr扩增uida能够检测大肠和志贺氏菌。
b:基因芯片技术:基因芯片(genechip)技术是建立在基因探针和杂交测序技术上的一种快速的---序列分析手段。它将各种基因寡核苷酸点样于芯片表面,微生物样品dna经pcr扩增后制备荧光标记探针,然后再与芯片上寡核苷酸点杂交,后通过检测杂交信号的强度及分布确定检测样品中特定微生物的存在与丰度。研发了检测大肠o157∶h7的芯片,并结合使用生物传感器,使得检测限降低到6×103cfu/ml。
酶底物法封口机检测优势
1.无需在无菌室内操作。
2.手工操作时间小于1分钟。
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
4.24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
操作方法
一:将水样加入100ml取样瓶中,加入酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解。
二:将样品加到定量检测盘中。
三:使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。
四:将封口好的定量检测盘放在36±1℃,如需测定粪大肠菌群(耐热大肠菌群)则将培养箱设定为44.5℃,培养24h。
五:对照比色盘数阳性(显黄色,或荧光)格子数,按照使用的检测盘类型,分别查51孔或者97孔mpn表得出100毫升中大肠菌群的菌群数,对照mpn表出数据。
六:根据稀释倍数结果按公式计算结果大肠菌群(个/l)=mpn值×稀释倍数×1000ml/100ml。
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