酶底物法封口机检测优势
1.无需在无菌室内操作。
2.手工操作时间小于1分钟。
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
4.24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
操作方法
一:将水样加入100ml取样瓶中,加入酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解。
二:将样品加到定量检测盘中。
三:使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。
四:将封口好的定量检测盘放在36±1℃,如需测定粪大肠菌群(耐热大肠菌群)则将培养箱设定为44.5℃,培养24h。
五:对照比色盘数阳性(显黄色,定量盘供应商,或荧光)格子数,按照使用的检测盘类型,分别查51孔或者97孔mpn表得出100毫升中大肠菌群的菌群数,对照mpn表出数据。
六:根据稀释倍数结果按公式计算结果大肠菌群(个/l)=mpn值×稀释倍数×1000ml/100ml。
平板计数法(tecount):该方法是统计物品含菌数的有效方法,操作的顺序是首先将样本进行适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼---察的菌落,然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞,因此平板菌落计数的结果往往偏低。
滤膜法(mf,membranefilter)滤膜法:是目前为流行的检测水中大肠群的方法。滤膜法的具体步骤是首先将一定量的水体样本注入0.45μm的滤膜过滤,经过抽滤,水中的---则被留在滤膜上,将滤膜贴于品红---酸钠培养基上培养24h,山东定量盘,温度为恒温37℃,这使得菌群因发酵乳糖而使得滤膜出现紫红色,通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位样本中的大肠的数量。
用iso9308-1规定的滤膜法测定水中大肠回收率均值为94.7%,定量盘,批内变异系数小于10%,检出限为500ml水样可检出1个cfu。该方法费用较低、原理简单、利于推广,但检测时间相对较长、步骤繁琐、干扰因素多,不适于大量样品的分析,无法满足污染物品快速检测需求。
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